Микробиологический мониторинг производственной среды: Руководство ЕЭК №20 и международные подходы

Коллегия Евразийской экономической комиссии 25 августа 2026 года приняла Рекомендацию № 20, которой утверждено Руководство по организации и проведению микробиологического мониторинга производственной среды для производителей стерильных и нестерильных лекарственных средств.

Документ систематизирует подходы к организации микробиологического мониторинга чистых помещений, оборудования и персонала, включая риск-ориентированное планирование, выбор точек отбора проб, методы контроля воздуха и поверхностей, мониторинг персонала и статистический анализ результатов.

Документ имеет рекомендательный характер. Государствам — членам ЕАЭС рекомендовано по истечении 180 календарных дней принимать Руководство во внимание при организации микробиологического мониторинга производственной среды.

Ниже представлен сравнительный анализ положений Руководства ЕЭК № 20 с подходами EU GMP Annex 1, руководства FDA Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing — Current Good Manufacturing Practice и фармакопейного раздела USP <1116>.

Стратегия контроля контаминации

Одним из центральных элементов Руководства ЕЭК № 20 является стратегия контроля контаминации (Contamination Control Strategy, CCS).

Документ предусматривает системный подход к предупреждению и контролю микробной контаминации производственной среды. Стратегия должна учитывать результаты оценки рисков и данные мониторинга, а также анализироваться и при необходимости актуализироваться.

По своей общей логике этот подход сопоставим с концепцией CCS, которая занимает центральное место в EU GMP Annex 1.

Границы применения Руководства

Руководство ЕЭК специально ограничивает область своего применения вопросами микробиологического мониторинга:

• чистых помещений;
• оборудования;
• персонала.

При этом в документе отдельно указано, что он не рассматривает микробиологический мониторинг очищенной воды, воды для инъекций, чистого пара и сжатых газов.

В отличие от этого, EU GMP Annex 1 рассматривает контроль контаминации как более широкую систему производственных и контрольных мероприятий.

Нестерильные лекарственные средства

Руководство ЕЭК допускает применение отдельных подходов, используемых при производстве стерильных лекарственных средств, к определенным нестерильным продуктам, если контроль и снижение микробной контаминации имеют для них существенное значение.

В частности, такой подход может быть применим к отдельным:

• жидким лекарственным формам;
• кремам;
• мазям;
• промежуточным биологическим продуктам с низкой бионагрузкой.

Однако это не означает автоматического распространения всех требований стерильного производства на нестерильные лекарственные средства. Применяемые подходы должны быть обоснованы и документированы.

Методология отбора проб и требования к методам

Выбор точек контроля: «метод сетки»

При квалификации чистых помещений Руководство предусматривает разделение контролируемой площади на секции для определения минимального количества точек отбора проб.

Например:

• до 8 м² — не менее одной точки;
• более 8 до 28 м² — две точки;
• более 28 до 52 м² — три точки.

Расположение точек и программа рутинного мониторинга должны определяться на основании результатов квалификации и анализа рисков.

FDA также требует научно обоснованного выбора точек мониторинга, однако не использует в своем руководстве идентичную схему минимального количества точек, основанную на площади помещения.

Контроль воздуха

Руководство ЕЭК предусматривает использование комбинации:

• активного (аспирационного) метода;
• пассивного (седиментационного) метода.

Седиментационный метод имеет полуколичественный характер. Поэтому его использование целесообразно рассматривать в сочетании с другими методами мониторинга воздуха.

Для соответствующих условий Руководство ограничивает время экспозиции седиментационных чашек. Подход с максимальной экспозицией до четырех часов соответствует принципу, используемому в EU GMP Annex 1.

Контроль поверхностей

Для мониторинга поверхностей может использоваться метод контактных пластин диаметром 55 мм.

Руководство предусматривает контакт пластины с исследуемой поверхностью:

• в течение 3–5 секунд;
• при стандартизированном одинаковом давлении.

Для сложных или труднодоступных участков может применяться метод смыва.

Рекомендуемая площадь отбора проб составляет от 25 до 100 см².

Конкретная площадь должна определяться с учетом:

• анализа рисков;
• критичности объекта;
• класса чистоты;
• особенностей поверхности;
• ожидаемого уровня контаминации;
• степени извлечения микроорганизмов, установленной при валидации метода.

Контроль перчаток персонала

Для контроля перчаток Руководство предусматривает метод отпечатка пальцев на поверхность питательной среды.

Для этого используется последовательный контакт всех пяти пальцев обеих рук с агаровой поверхностью в течение установленного времени.

Для наиболее критических зон предусмотрен контроль перчаток после выполнения критических технологических операций и при выходе из соответствующей чистой зоны.

По своей общей логике этот подход соответствует требованиям EU GMP Annex 1 к мониторингу персонала и перчаток. При этом Руководство ЕЭК более подробно описывает технику выполнения самого отбора проб.

Ограничения методов и степень извлечения микроорганизмов

Руководство ЕЭК № 20 отдельно рассматривает ограничения методов микробиологического мониторинга.

Документ указывает, что степень извлечения микроорганизмов с поверхностей при мониторинге может составлять менее 50% даже при относительно высоком уровне исходной контаминации.

В реальных производственных условиях степень извлечения может быть еще ниже.

Результаты мониторинга должны оцениваться с учетом:

• применяемого метода;
• характеристик контролируемой поверхности;
• условий отбора проб;
• данных предыдущего мониторинга;
• общей оценки состояния производственной среды.

Обработка данных и анализ трендов

Руководство ЕЭК № 20 подробно рассматривает статистическую обработку данных микробиологического мониторинга.

Традиционным показателем остается количественный подсчет колониеобразующих единиц (КОЕ).

Одновременно документ предусматривает применение статистических инструментов для анализа:

• случайных колебаний;
• устойчивых тенденций;
• отклонений от трендов;
• частоты обнаружения микробного роста.

Частота обнаружения и USP <1116>

Руководство ЕЭК предусматривает метод частоты обнаружения.

Он основан на определении доли проб, в которых был выявлен микробный рост, независимо от количества обнаруженных колоний.

Например, частота обнаружения 1% означает, что микробный рост был выявлен в одной из ста проанализированных проб.

По своей логике этот показатель близок к подходу Contamination Recovery Rate (CRR), используемому в USP <1116>.

USP <1116> приводит Suggested Initial Contamination Recovery Rates — рекомендуемые исходные показатели частоты восстановления контаминации:

• ISO 5 — менее 1%;
• ISO 6 — менее 3%;
• ISO 7 — менее 5%;
• ISO 8 — менее 10%.

Речь идет именно о рекомендуемых исходных показателях, а не о жестких универсальных лимитах.

Руководство ЕЭК использует собственную формулировку метода частоты обнаружения и предусматривает применение статистических подходов к анализу данных. Для асептического производства документ также допускает использование методов анализа случайных колебаний и устойчивых тенденций с отсылкой к соответствующим монографиям USP <1032> и USP <1033>.

Математические методы определения уровней тревоги и действия

Руководство ЕЭК допускает различные подходы к определению уровней тревоги и действия.

При отсутствии достаточного массива исторических данных могут использоваться временные подходы, основанные на процентах от установленных максимальных пределов.

По мере накопления данных Руководство предусматривает применение статистических методов.

Подход процентилей

Документ приводит конкретные значения процентилей, которые могут использоваться для определения контрольных уровней.

Для уровней тревоги:

• 95-й процентиль;
• 97,5-й процентиль.

Для уровней действия:

• 99-й процентиль;
• 99,85-й процентиль.

Выбор других значений должен быть обоснован в программе мониторинга.

Исторические данные

Для отдельных подходов, основанных на использовании накопленных данных, Руководство предусматривает массив не менее 100 результатов.

При этом накопление ста значений не означает автоматического перехода на определенный статистический метод. Достаточный объем исторических данных позволяет применять статистические инструменты для определения уровней тревоги и действия и анализа состояния контролируемой среды.

Правило трех сигм и особенности микробиологических данных

Руководство подробно рассматривает применение правила 3σ.

При использовании этого подхода необходимо учитывать характер распределения данных.

Документ отдельно отмечает, что микробиологические данные часто не подчиняются нормальному распределению.

При нормальном распределении диапазон ±3σ охватывает около 99,7% значений. Для некоторых ненормальных распределений этот показатель может составлять около 88%.

Поэтому применение правила трех сигм требует оценки характера распределения и применимости статистической модели к конкретному набору данных.

Контрольные карты Шухарта и анализ трендов

Для анализа результатов мониторинга Руководство предусматривает использование контрольных карт Шухарта.

Они могут применяться для выявления:

• случайных колебаний;
• устойчивых тенденций;
• последовательных изменений результатов.

Одним из признаков отклонения от тренда может быть наличие шести последовательно возрастающих или убывающих точек.

Идентификация микроорганизмов и локальные изоляты

Критические зоны

Для зон классов А и В предусмотрена идентификация обнаруженных микроорганизмов до биологического вида.

Полученные результаты должны использоваться для оценки:

• возможного влияния на качество продукции;
• потенциального воздействия на затронутые серии;
• состояния системы контроля производственной среды.

EU GMP Annex 1 также предусматривает идентификацию микроорганизмов из наиболее критических зон до видового уровня.

FDA Guidance предусматривает рутинную идентификацию микроорганизмов в критических и непосредственно прилегающих контролируемых зонах — до вида или, при необходимости, до рода.

Локальные изоляты

Отдельное внимание Руководство уделяет локальным изолятам — микроорганизмам, характерным для конкретной производственной площадки.

Документ предусматривает возможность их использования:

• при контроле питательных сред;
• в валидационных испытаниях;
• при оценке антимикробной эффективности дезинфицирующих средств.

Руководство рекомендует дополнять рабочую коллекцию репрезентативными локальными изолятами.

Для локальных изолятов предусматривается оформление соответствующей документации, включая паспорт или спецификацию.

Документация может содержать дополнительную визуализацию изолята, например фотографию. Фотофиксация при этом не является обязательным требованием.

Основные источники

1. Евразийская экономическая комиссия. Рекомендация Коллегии ЕЭК № 20 от 25 августа 2026 года и Руководство по организации и проведению микробиологического мониторинга производственной среды:
   Официальный документ ЕЭК
2. European Commission. EU GMP Annex 1 — Manufacture of Sterile Medicinal Products:
   Официальный текст EU GMP Annex 1
3. European Commission. EudraLex — Volume 4 — EU Guidelines for Good Manufacturing Practice:
   EudraLex Volume 4
4. U.S. Food and Drug Administration. Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing — Current Good Manufacturing Practice:
   FDA Guidance for Industry
5. United States Pharmacopeia. USP <1116> — Microbiological Control and Monitoring of Aseptic Processing Environments:
   Официальная страница USP <1116>